science-review.ru
На современном этапе развития онкологии и разработки различных методов лечения, одним из самых перспективных направлений является таргетная терапия раков, основанная на конкретных убедительных данных ключевых звеньев патогенеза рака [1]. Одним из изучаемых механизмов малигнизации различных тканей является ангиогенез в опухолях различной локализации [2]. Часть методов мишеневой терапии рака в целом и ангиогенеза, в частности, направлена на ингибирование прорастания сосудов в опухоль. В большей степени исследования выполняются на моделях экспериментальных животных, рыбках zebra fish, изучаются транскриптомные профили нейтрофилов, ассоциированные с опухолью, устанавливается значение и их роль в усилении ангиогенеза при малигнизации тканей [3].
В опухоли микроокружение, влияние гипоксии на раковые клетки и роль их метаболитов в индукции ангиогенеза и васкуляризации опухоли остаются на современном этапе наименее изученными вопросами [4]. Результаты исследований Sun H 1, Jia J, Wang X, Ma B, Di L, Song G, Ren J. (2013) показали, что стволовые клетки рака молочной железы CD44+/CD24 обладают значительным проангиогенным потенциалом и активностью [5]. Это дает новые идеи для изучения при разработке таргетных методов лечения.
Исследование Alhawarat F.M., Hammad H.M., Hijjawi M.S., (2019) показало, что хеморезистентные и миграционные свойства стволовых клеток крови (CSC) в определенной степени усиливаются при гипоксии. Микроокружение CSC HYP способствует ангиогенезу и миграции опухоли. Гипоксия является ключевым игроком в ангиогенезе опухоли, опосредованном CSC [6].
Морфологическими особенностями кровеносных сосудов в опухолях являются хаотические ветвящиеся структуры и пористые сосудистые люмены, что приводит к неравномерному поступлению кислорода в микроокружение опухоли. Высокая скорость метаболизма и пролиферации опухолевых клеток еще больше истощает местное снабжение кислородом. Поэтому, гипоксия – это общее явление в множественных оухолях различной локализации. Гипоксия-индуцируемые факторы (HIFs) регулируют транскрипцию спектра генов, которые жизненно важны для адаптации опухолевых клеток при гипоксии, и формируют опухолевое микроокружение для более благоприятных условий для прогрессирования. HIFs включаются в почти каждое звено патогенеза рака через индукцию ангиогенеза, метаболического перепрограммирования, метастазов, трофическое обеспечение стволовых клеток рака, хеморезистенции, и иммунной толерантности.
По мнению Abakumova TV, Gening SO, Dolgova DR,(2018), антиангиогенная терапия требует поиска молекулярных маркеров ангиогенеза при раках различной локализации [7]. Диагностическая и прогностическая роль VEGFA в малигнизации на современном этапе противоречива. В цитоплазматической экспрессии VEGF-A авторы не нашли существенных различий в зависимости от реакции на химиотерапию. У 58 % пациентов уровень мРНК VEGF был повышен. Не было установлено никакой корреляции между уровнями VEGF сыворотки и транскриптом в опухолевой ткани. Генотипирование показало, что сочетание генотипов CC/ GG снижает риск рецидива в 2,6 раза. Полученные авторами результаты позволили поставить под вопрос значение изучения сывороточного уровня VEGF для оценки чувствительности онкологических пациентов к антиангиогенным препаратам.
Более поздние исследования оказали значимость VEGF в малигнизации тканей различной локализации и определило этот фактор одним из ключевых в таргетной терапии рака. Экспрессия маркеров активации CD69 и CD25 на Т-клетках с VEGFR2–экспрессирующими клетками составила 41 % и 48 %, а продукция IL-2 и IFN-γ-470 пг/мл и 360 пг/мл соответственно. Экспрессия маркера дегрануляции CD107a составила 30 %, а цитотоксическая активность Т-клеток достигла более 30 % при соотношении E:T 9: 1. Анти-VEGFR2, но не Т-клетки опосредовали специфический лизис 293–KDR клеток, с экспрессией VEGFR2 и может рассматриваться в качестве кандидата на мишеневые структуры для T-клеточной иммунотерапии твердых опухолей [8].
Твердые опухоли, которые ответственны за более чем 85 % случаев смерти от рака, нуждаются в ангиогенезе для их роста и метастазирования. Среди антиангиогенных методов лечения перспективной стратегией было нацеливание на сосудистый эндотелиальный рецептор 2 фактора роста (VEGFR2), который чрезмерно выражен на опухолевых сосудах [9].
Синтезирована серия новых ангиогенных препаратов, N 9–гетеробивалентных β-карболинов. Все новые соединения были проверены на их противораковую активность против шести опухолевых клеточных линий in vitro, часть из них показала сильный цитотоксический эффект. Были также оценены противоопухолевые эффективности смесей этих препаратов на моделях мышей, опухолевое ингибирование через ангиогенез ингибирующий эффект достигнуто в более, чем 40 % в саркомах и раке лёгких Льюиса [10].
Результаты Wichaiyo S, Lax S, Montague SJ, Li Z, (2018) показали, что в отличие от дефектов коагуляции, кровотечения после потери целостности сосудов, вызванной дефицитом тромбоцитов CLEC-2 и GPVI, способствуют восстановлению сосудов, увеличивая отложение фибриногена, уменьшая воспаление и способствуя ангиогенезу [11].
Обычно таргетное лечение направлено на регресс опухолевого роста и появления метастазов. Благодаря блокировке процесса клеточного деления и остановке кровоснабжения с помощью таргетных препаратов нарушается нормальное развитие опухоли, что постепенно оборачивается ее естественным отмиранием. Несомненное преимущество целевого воздействия, которым обладает таргетная терапия, разрушительное действие только на малигнизирующиеся клетки. Целенаправленность дает возможность угнетать развитие злокачественной онкологии легочной системы, почек, груди у женщин естественным путем и без побочных эффектов и последствий. Минусами таргетной терапии является необходимость глубокого молекулярного и генетического обследования пациентов для подбора максимально действенного средства.
Для разрушения сосудистой сети в опухоли используют авастин, что делает невозможным дальнейшую малигнизацию ткани. Препарат показал высокий эффект при почечной, легочной и молочножелезистой патологии. Герцептин останавливает малигнизацию, воздействуя на различные факторы данного процесса, улучшая прогноз на 30–45 %, что улучшает медиану выживаемости.
Быстрое развитие лекарственной противораковой индустрии ведёт к пополнению арсенала таргетной терапии, расширяющими диапазон применения в онкологии.
Derosa L, Bayar MA, Albiges L, Le Teuff G, Escudier B. (2019) считают, что одним из важнейших факторов риска и перспективных показателей выживаемости пациентов с раком различной локализации является степень развития микроциркуляторного русла в оухоли [12].
Росту аномальных кровеносных и лимфатических сосудов в опухоли способствуют условия гипоксии, низкая рН, и повышенное давление жидкости. Эти аномалии способствуют прогрессированию опухоли, иммуносупрессии и резистентности к лечению. В 2001 году была выдвинута новая гипотеза о том, что адекватное использование препаратов, подавляющих ангиогенез для репрессии трофики опухолей быстро нормализует сосуды опухоли и улучшает действие противоопухолевых препаратов, вводимых во время периода нормализации. В дополнение к предоставлению доклинических и клинических доказательств в поддержку этой гипотезы, были выявлены основные молекулярные механизмы их действия. Для использования различных стратегий нормализации трофики тканей следует учитывать также изменения матрикса ткани, изменяющих кровоток в микроциркуляторном русле.
Суперсемейство рецепторов фактора некроза опухоли (ТНФ) включает остеопротегерин (ОПГ) и его лиганды, которые являются активаторами рецепторов ядерного фактора каппа-б лиганд (Ранкл) и связаны с ТНФ апоптоз-индуцирующим лигандом. Система OPG / RANKL / RANK играет активную роль в патологическом ангиогенезе и воспалении, а также выживании клеток. Наличие перекрестных взаимодействий между эндотелиальными клетками и остеобластами в процессе остеогенеза свидетельствует о связи между ангиогенезом и остеогенезом. Система OPG / RANKL/RANK / TRAIL действует на определенные рецепторы поверхности клеток, которые затем могут передавать свои сигналы другим внутриклеточным компонентам и изменять экспрессию генов. Цитокиновая индукция рецепторов индуцирует механизмы активации моноцитов и нейтрофилов, а также эндотелиальных клеток. Полученные данные Rochette L, Meloux A, Rigal E, Zeller M, Cottin Y, Vergely C. (2019) подтверждают роль повышенного соотношения OPG / RANKL, как возможного маркера прогрессирования эндотелиальной дисфункции при метаболических нарушениях в соотношении с уровнем воспалительного маркера [13]. Мы рассматриваем роль триады OPG / RANKL / RANK в сосудистой функции, а также молекулярные механизмы, связанные с этиологией сосудистых заболеваний. Потенциальные терапевтические стратегии, направленные для ингибирования механизмов ангиогенеза, являются перспективными в разработке таргетных стратегий в будущем.
Исследования, проводимые в последние десятилетия, убедительно доказали ключевую роль опухолево-ассоциированных кровеносных и лимфатических сосудов в метастазировании и в ингибировании иммунной защиты, опосредованной Т-клетками. Доказано, что рост опухоли и кровеносных сосудов частично регулируется иммунной системой с участием инфильтративных врожденных, а также адаптивных иммунных клеток, обеспечивающих как иммуносупрессивные, так и различные ангиогенные сигналы. Опухолевому ангиогенезу и толерантности иммуноцитов к опухолевым клеткам способствует инактивация хемокинов и цитокинов. Регуляция врожденных и адаптивных иммунных клеток в регуляции ангиогенеза при прогрессировании опухоли и метастазах зависит от новых терапевтических подходов, которые будут мишенево направлены не только на сосудистую систему опухоли, но и на иммунную составляющую для поддержания и улучшения консервативной терапевтической эффективности при раке.
Селективное ингибирование мутантного белка BRAF является перспективным терапевтическим подходом для пациентов с меланомой, ассоциированной с мутацией BRAF. Несмотря на замечательный клинический ответ, организм большинства пациентов проявляет сопротивление ингибитору BRAF на молекулярном уровне. Были созданы четыре лекарственно стойких клеточных линий меланомы из парных первичных метастатических клеточных линий с использованием аналога препарата vemurafenib PLX4720. Три из устойчивых клеточных линий показали снижение роста после отмены препарата, но клеточная линия (WM278) рогрессивно пролиферировала. Кроме того, наблюдалось противоположная ожидаемой реакция, когда препарат способствовал опухолевой прогрессии. При использовании геномного и протеомного подходов, обнаружено значительное изменение между чувствительными и устойчивыми клеточными линиями, о некоторых из которых ранее не сообщалось. В дополнение к нескольким другим изменениям, увеличение количества копий наблюдалось во всех устойчивых клеточных линиях на 8q24.11–q24.12 и 8q21.2. Анализ экспрессии генов показал, что большинство генов, регулирующих устойчивость клеточных линий, были связаны с миграционной активностью клеток и ангиогенезом. Повышенная экспрессия шести белков (ANGPLT4, EGFR, Endoglin, FGF2, SerpinE1 and VCAM-1) и снижение экспрессии двух белков (osteopontin and survivin) наблюдались последовательно во всех устойчивых клеточных линиях. Таким образом, новые геномные изменения и модели экспрессии белка связаны с устойчивым фенотипом.
Vasconcelos RAT, Guimaraes Coscarelli P, Vieira TM, с соавторами (2019), изучая злокачественные опухоли периферических нервных оболочек (MPNSTs) – редкие и агрессивные саркомы мягких тканей с ранним метастазированием и неясным патогенезом, исследуя плотность тучных клеток (MCD), и микрососудов (MVD), а также индекс пролиферации (Ki-67) в MPNST, сделали вывод, что различные распределения тучных клеток и микрососудов свидетельствуют о том, что ангиогенез в MPNST происходит независимо. Роль тучных клеток в опухолевой прогрессии, по мнению авторов, неясна и не имеет прогностического значения [14]. Это ошибочное заключение, по-нашему мнению, так как тучные клетки являются регуляторами местного гомеостаза. Влияя на проницаемость сосудистой стенки и изменение межклеточного матрикса, способствуя миграции из сосудистого русла лейкоцитарного пула, вызывая отёк ткани вокруг сосудов, с одной стороны, уменьшают трофическое обеспечение структур, а с другой, выделяют множество провоспалительных факторов.
Исследование выполнено при финансовой поддержке в рамках государственного задания РНФ 2014/36 от 03.02.2014 -17.5740/2017/6.7.